產(chǎn)品更新-小鼠成纖維細胞

培養(yǎng)基 EMEM完-全培養(yǎng)基：90%EMEM+10%FBS

傳代方法 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完-全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)耐?全培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復(fù)傳代操作或者凍存。

生長條件 37℃；5%CO2+95%空氣；
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
安全等級 1
形態(tài) 成纖維細胞樣，多角形，圓形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長，背景干凈，不產(chǎn)色素，無空泡
應(yīng)用領(lǐng)域 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細胞系L的克隆。細胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone 929是最早的克隆株。 從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L。 第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。 檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。